細(xì)胞劃痕實驗
2019-10-31 02:30:23 訪問:169所需材料：
6孔板、marker筆、直尺、20微升槍頭（滅菌）、無血清培養(yǎng)基、PBS
準(zhǔn)備工作：
所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）
操作流程：
1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、在空中加入約5X105個細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。
4、用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時取樣。
6、拍照。