貨號(hào):10470-1, 包裝:500T,價(jià)格:220元
貨號(hào):10470-2, 包裝:1000T,價(jià)格:380元

英文名稱:MTT KIT
MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品組成:
500T | ||
MTT 溶液: | 5ML | -20℃保存 |
Formazan 溶解液: | 60ML | 室溫/-20℃ |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
MTT 可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物 formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解,然后通過酶標(biāo)儀可以測(cè)定 490nm 波長(zhǎng)附近的吸光度。
細(xì)胞增殖越多越快, 則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。
使用說明:
1. 收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞懸液濃度,分于 96 孔板,每孔 180μL,3000-10000 個(gè)細(xì)胞/孔。
2. 置 37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細(xì)胞貼壁,培養(yǎng) 6-24 小時(shí)。
3. 加入適當(dāng)濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間。
4. 小心吸去上清,加入90μL 新鮮培養(yǎng)液,再加入10ul MTT 溶液,繼續(xù)培養(yǎng) 4 h。
5. 然后吸掉上清,每孔加入 110μL Formazan 溶解液,置搖床上低速振蕩 10 min,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀 490 nm 處測(cè)量各孔的吸光值。
6. 同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan 溶解液),對(duì)照孔(細(xì)胞、同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、Formazan 溶解液),每組設(shè)定 3 復(fù)孔。
注意事項(xiàng):
1. 由于使用 96 孔板進(jìn)行檢測(cè),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于 96 孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加 PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面, 可以把 96 孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
2.MTT 溶液為黃色需避光保存,長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用。 Formazan 溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以 37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后 使用。
3.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。