產(chǎn)品名稱：2xTaq PCR MasterMix（Dye）

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英文名稱：2xTaq PCR預(yù)混試劑

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儲存條件：-20°C

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應(yīng)用:科研

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2 × Taq PCR MasterMix(Dye)

【產(chǎn)品概述】

本產(chǎn)品包含Taq DNA Polymerase、dNTP以及優(yōu)化的緩沖體系，只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增體系中加入的保護(hù)劑使得2 × Taq PCR Master Mix反復(fù)凍融后仍可保持穩(wěn)定活性。本品提供含有電泳緩沖液和染料的版本，可在反應(yīng)結(jié)束后直接進(jìn)行電泳，使用方便。

【產(chǎn)品組分】

組分	規(guī)格	保存條件
2xTaq PCR MasterMix	1ML	-20℃
ddH2O	1ML	-20℃
Loading  Dye  in MasterMix	Yes	-

【使用范例】

一、PCR 反應(yīng)體系

組分	推薦用量
2×Taq PCR Master Mix	10 μl
Forward Primer(10uM)	0.5 μl
Reverse Primer (10uM)	0.5 μl
裂解產(chǎn)物（DNA模板）	1 μl
ddH2O	補(bǔ)足至20 μl

注：各組分使用前應(yīng)充分混勻。

1. 推薦使用20 μl，也可根據(jù)使用習(xí)慣調(diào)整體系體積大小。

2. 由于Taq DNA Polymerase在室溫下也有一定的反應(yīng)活性，PCR反應(yīng)體系請?jiān)诒线M(jìn)行配制，之后再置于PCR儀上進(jìn)行反應(yīng)。這樣可以減少在反應(yīng)準(zhǔn)備階段發(fā)生的非特異擴(kuò)增，有助于得到高特異性的擴(kuò)增結(jié)果。

 

 

 

二、PCR 反應(yīng)條件

步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	98 ℃	3 min	1 cycle
變性	98 ℃	15 sec	30-35 cycles
退火	56 ℃	15 sec
延伸	72 ℃	15 sec/Kb
終延伸	72 ℃	5 min	1 cycle

1. 該預(yù)變性條件適合絕大多數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)，可根據(jù)模板結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度修改。如模板結(jié)構(gòu)復(fù)雜，可將預(yù)變性時(shí)間延長至5-10 min以提高預(yù)變性效果；

2. 退火溫度需要根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行調(diào)整，一般設(shè)置成低于引物Tm值3 ~ 5 ℃即可；對于復(fù)雜模板，需要調(diào)節(jié)退火溫度和延長延伸時(shí)間來實(shí)現(xiàn)高效擴(kuò)增。

【注意事項(xiàng)】

1. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護(hù)性措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途！