產(chǎn)品名稱：探針法熒光定量PCR試劑盒（無ROX）

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產(chǎn)品別名：探針法熒光定量試劑盒

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英文名稱：2×qPCR Mix （Probe）

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英文別名：Probe

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儲存條件：-20°C

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應(yīng)用:科研

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2×qPCR Mix (Probe)

產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品是采用探針法進(jìn)行qPCR的專用試劑，可對目的基因片段進(jìn)行定量檢測。產(chǎn)品采用了抗體修飾的新型熱啟動Taq DNAPolymerase，配合創(chuàng)新優(yōu)化的最適Buffer，能夠進(jìn)行高特異性、高靈敏度的qPCR檢測，定量結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好、可信度高。本產(chǎn)品不包含ROX Reference Dye，適用于無需添加ROX的Real-Time PCR儀。

產(chǎn)品組成

組分	100 rxns/20μlreaction	500 rxns/20μlreaction
2×qPCR Mix (Probe)	1.0 mL	5×1.0 mL

實(shí)驗(yàn)流程

1. 在qPCR管中配制如下反應(yīng)體系

2×qPCR Mix (Probe)a	10.0 μl
Primer1 (10 μM)b	0.4μl
Primer2 (10 μM)b	0.4μl
TaqMan Probe (10 μM)c	0.2μl
Template DNA/cDNAd	x μl
ddH2O	Up to 20.0 μl

 

a 使用前請確認(rèn)完全溶解，并充分混勻。

b 通常反應(yīng)體系中引物終濃度為0.2 μM。當(dāng)反應(yīng)性能較差時，可以在終濃度0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)調(diào)整優(yōu)化。

c 探針濃度通常在0.05 - 0.25 μM范圍內(nèi)調(diào)整。

d 模板加入量因待測基因拷貝數(shù)差異而不同，可進(jìn)行模板梯度稀釋預(yù)試驗(yàn)得到最佳用量。模板用量建議不超過100 ng。推薦將模板稀釋后加入反應(yīng)體系中，以提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。如模板為未稀釋cDNA原液，加入體積不應(yīng)超過qPCR反應(yīng)總體積的1/10。

2. 按照如下程序進(jìn)行qPCR反應(yīng)

階段	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	95℃	30 sec	1 cycle
循環(huán)反應(yīng)	95℃	15 sec	45 cycles 60℃采集熒光信號
	60℃	30 sec

 

 

保存條件

-25 ~ -15℃避光保存。

 

技術(shù)支持

本公司產(chǎn)品使用過程中如有任何疑問，歡迎隨時與我們聯(lián)系。