貨號:10208-1, 包裝:100ml,價(jià)格:120元

產(chǎn)品別名:油紅O
英文名稱:Oil Red O
英文別名:Oil Red O
分 子 量:408.495
儲存條件:RT
油紅O染液(Oil Red OStaining Solution)說明書
產(chǎn)品簡介:
利用染料易溶于脂質(zhì)的性質(zhì),檢測組織中脂肪含量的多少。
操作流程:
1,試劑制備-----工作液的配制,將油紅O儲存液與去離子水以6:4混合,室溫下放置10min,022μm濾膜過濾,新鮮配制的工作液2h之內(nèi)使用。
2,細(xì)胞染色程序-----①當(dāng)培養(yǎng)細(xì)胞的密度達(dá)到5-6×10∧5cells/ml時(shí),倒掉培養(yǎng)基,用0.01MPBS洗滌細(xì)胞2次;②細(xì)胞固定,用含10%甲醛的磷酸鹽緩沖液固定細(xì)胞10min; ③ 漂洗,細(xì)胞用PBS漂洗一次(1min),然后用60%異丙醇沖洗15s,促進(jìn)中性脂肪的染色;④油紅O 染色,避光室溫處下,用已過濾的油紅O 工作液染細(xì)胞10-20min;⑤脫色,用60%異丙醇處理細(xì)胞15s;⑥漂洗,用PBS漂洗3次,每次3min;⑦復(fù)染,可用蘇木素復(fù)染1min;⑧漂洗,用PBS漂洗3次,每次3min;⑨封片劑封片;⑩顯微鏡下觀察,陽性染色細(xì)胞為紅色。
3,冰凍切片染色程序
① 福爾馬林固定冰凍切片后,流動自來水沖洗1-10min
② 60%異丙醇漂洗
③ 新鮮制備的油紅O工作液染色15min
④ 60%異丙醇漂洗
⑤ 在蘇木素染色液中蘸5下,輕輕染核
⑥ 蒸餾水漂洗
⑦ 水溶性封片劑或甘油明膠封片劑封片
注意事項(xiàng):
①由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,所以一般用冰凍切片染色來顯示
②做脂肪染色的切片不能太薄,過薄的切片常常會使脂質(zhì)丟失
③如果使用蘇木素進(jìn)行復(fù)染,復(fù)染時(shí)間不能過長
④染色結(jié)果不能長期保存,應(yīng)盡快拍照并觀察
⑤第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)
⑥為了您的自身安全,使用試劑前請做好防護(hù),如穿實(shí)驗(yàn)服帶手等。
保存溫度:室溫避光
包裝規(guī)格:100ml